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    ELISA試劑盒測定方式我有辦法

    發(fā)布時間: 2015-06-19  點擊次數(shù): 1448次

        ELISA已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題,是一種特殊的試劑分析方法,是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。ELISA試劑盒該法由種類和變化可分為雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、應(yīng)用親和素和生物素的ELISA,今天我們就來看看ELISA試劑盒測定方式總結(jié)。

        一、定量測定
        ELISA操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA試劑盒,標準曲線的范圍一般較寬,曲線zui高點的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數(shù)紙,以檢測物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。
        二、定性測定
        定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應(yīng)的強度,其實質(zhì)仍是一個定性試驗。ELISA試劑盒在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標本反應(yīng)性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。

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