精品无码久久久久久久动漫,国产亚洲精品久久久999蜜臀,免费无码成人AV电影在线播放,白嫩少妇激情无码

您好,歡迎進(jìn)入研域(上海)化學(xué)試劑有限公司網(wǎng)站!
一鍵分享網(wǎng)站到:
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    發(fā)布時(shí)間: 2011-10-24  點(diǎn)擊次數(shù): 3051次

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    HRP分子中與酶活性無關(guān)的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發(fā)生自身偶聯(lián),在標(biāo)記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結(jié)合反應(yīng)后,再加入硼氫化鈉還原成穩(wěn)定的結(jié)合物。

    (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;
    (2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色,置4℃放置30min,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色;
    (3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應(yīng);
    (4) 加入待標(biāo)記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 CBS,調(diào)節(jié)pH值至9.0;
    (5) 混勻,置4℃過夜改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
    (6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;
    (7) 對(duì)0.01mol/L,pH7.4 PBS,4℃透析過夜,換液3次;
    (8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;
    (9) 收集上清液即為酶標(biāo)記抗體。

    【注意事項(xiàng)】
    (1) 在氧化HRP時(shí),以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。
    (2) 一般認(rèn)為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。
    (3) 氧化HRP時(shí)間以15-30min為宜。
    (4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。
    (5) 加入乙二醇的目的是終止反應(yīng);為便于在加入抗體后調(diào)pH值,故乙二醇要用0.05mol/L CBS配制。
    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
     

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務(wù)熱線

021-54479081
021-54461587

日产精品一线二线三线区| 久久爱色欲AV| 国产成人免费ā片在线观看| 中文字幕亚洲一区二区三区| 国产免费一区二区在线a片视频| 好久不见在线观看免费高清| 野花日本韩国视频免费8 | 曰韩人妻无码一区二区三区综合部 | 色综合色综合久久综合频道88| free性丰满hd性欧美| 亚洲欧美V国产一区二区| 又爽又高潮日本少妇a片| 亚洲国产精品无码中文在线| 麻花传媒剧在线mv免费观看| chinese体育生打飞j视频| 暴力调教一区二区三区| 亚洲精品久久久无码av片软件| 无码熟妇人妻av在线网站| 午夜福利在线观看| 欧美性BBBBBXXXXXXX| 免费国产黄网站在线观看视频 | 午夜理论2019理论无码| 无码人妻久久一区二区三区蜜桃| 国产无套内射普通话对白| 十大禁用的免费游戏手游中文 | 日韩在线 | 中文| 国产午夜激无码av毛片app| 无码国产成人AV在线播放| 亚洲国产另类久久久精品黑人 | 久久亚洲美女精品国产精品| 大胆欧美熟妇XXBBWWBW| 国产精品久久人妻无码网站一区 | 黑人粗进入欧美| 久久久久成人精品| 少妇又色又紧又爽又刺激视频| 国产无套白浆一区二区| 国精产品一区二区三区公司| 亚洲乱码中文字幕久久孕妇黑人| 中国极品少妇xxxxx| 亚洲精品一区二区三区中文字幕 | 免费三级现频在线观看免费|