精品无码久久久久久久动漫,国产亚洲精品久久久999蜜臀,免费无码成人AV电影在线播放,白嫩少妇激情无码

您好,歡迎進(jìn)入研域(上海)化學(xué)試劑有限公司網(wǎng)站!
一鍵分享網(wǎng)站到:
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    發(fā)布時(shí)間: 2011-10-24  點(diǎn)擊次數(shù): 3051次

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    HRP分子中與酶活性無關(guān)的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發(fā)生自身偶聯(lián),在標(biāo)記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結(jié)合反應(yīng)后,再加入硼氫化鈉還原成穩(wěn)定的結(jié)合物。

    (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;
    (2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色,置4℃放置30min,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色;
    (3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應(yīng);
    (4) 加入待標(biāo)記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 CBS,調(diào)節(jié)pH值至9.0;
    (5) 混勻,置4℃過夜改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
    (6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;
    (7) 對(duì)0.01mol/L,pH7.4 PBS,4℃透析過夜,換液3次;
    (8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;
    (9) 收集上清液即為酶標(biāo)記抗體。

    【注意事項(xiàng)】
    (1) 在氧化HRP時(shí),以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。
    (2) 一般認(rèn)為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。
    (3) 氧化HRP時(shí)間以15-30min為宜。
    (4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。
    (5) 加入乙二醇的目的是終止反應(yīng);為便于在加入抗體后調(diào)pH值,故乙二醇要用0.05mol/L CBS配制。
    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
     

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務(wù)熱線

021-54479081
021-54461587

国产精品国色综合久久| 亚洲乱亚洲乱妇50p| av免费网站在线观看| 色欲久久精品亚洲AV无码一区| 护士奶头又白又大又好摸视频 | a片在线观看免费| 97性无码区免费| 久久久国产精华液2023| 亚洲精品国产suv一区88| 人妻无码久久中文字幕专区 | 国产成A人亚洲精V品无码| 国产乱码卡二卡三卡4| YY111111少妇影院无码| 男男做爰猛烈高潮在线观看| 免费1级a做爰片观看| 精品无码国产自产拍在线观看蜜| 国产精华2020| 人妻少妇久久久久久97人妻| 亚洲熟妇色XXXXX欧美老妇| 吃奶揉捏奶头高潮视频在线观看| 国产一区二区三区久久精品| 国产激情无码一区二区APP| 日韩人妻无码一区二区三区| 国产精品成人无码久久久| 波多野结衣一区二区三区av高清| 久久天天躁狠狠躁夜夜免费观看 | 精品麻豆国产色欲色欲色欲WWW | 女人和拘做受全过程免费| 亚洲V欧美V国产V在线观看| 成年美女黄网站色大片免费看| 国产日韩一区二区三免费高清| 亚洲一区二区三区日本久久九 | 男人靠女人免费视频网站| 国产永久免费裸体美女视频| yy111111少妇无码理论片| 国产精品亚洲精品日韩已方| 日本艳鉧无码动漫1~6| 色欲综合久久躁天天躁蜜桃| 国产激情久久久久久熟女老人| 国产亚洲精品久久久闺蜜| 嫩草院一区二区乱码|