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    關(guān)于細(xì)胞因子ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件

    發(fā)布時(shí)間: 2019-12-31  點(diǎn)擊次數(shù): 1322次

    細(xì)胞因子ELISA試劑盒液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

    血清: 室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 

    血漿: 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

    尿液: 用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)施。

    細(xì)胞培養(yǎng)上清: 檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管搜集。

    ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件如下:
        
    1、固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。 
        
    2、包被抗體或抗原的挑選:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。
        
    3、 酶標(biāo)記抗體作業(yè)濃度的挑選:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法",在正式試驗(yàn)體系里準(zhǔn)確地滴定其作業(yè)濃度。
        
    4、酶的底物及供氫體的挑選:對供氫體的挑選要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。

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