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    研究干細胞生物學的性狀

    發(fā)布時間: 2018-12-12  點擊次數(shù): 1244次

    干細胞的培養(yǎng)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于產(chǎn)前遺傳學確診,但其生物學性狀和在體內(nèi)的來歷仍沒有*明晰。羊水中包含了多種異質(zhì)細胞群,這些細胞首要來歷于胎兒的肌膚,胎兒的消化器官、呼吸器官和尿道,以及羊膜上皮。間充質(zhì)干細胞( MSCs) 是干細胞宗族的首要成員,來歷于發(fā)育前期的中胚層和外胚層。MSCs 開始在骨髓中發(fā)現(xiàn),因其具有多向分化潛能、造血支持和推動干細胞植入、免疫調(diào)控和自我拷貝等特征而日益遭到我們的注重。

    均有成功分別羊水來歷干細胞的報道,大多是運用羊水細胞貼壁的特征通過多次傳代的方法獲得干細胞。Tsai MS 等選用兩步培養(yǎng)法從孕中期羊水中成功分別出具有MSCs 特征的干細胞。隨后De Coppi 等通過免疫磁珠方法分別出c - Kit ( CD117) 陽性細胞,這些細胞在體外增殖靈敏,可以構(gòu)成安穩(wěn)的細胞系,他將這些細胞命名為羊水干細胞。此外通過克隆化培養(yǎng)的方法也可以從羊水中獲得干細胞。從現(xiàn)有研討情況看來,如今沒有構(gòu)成一起的羊水干細胞培養(yǎng)體系。
    國產(chǎn)ELISA試劑盒選用貼壁法分別獲得羊水細胞,培養(yǎng)細胞運用低糖DMEM 培養(yǎng)基。收集的20 例羊水標本中有17 例原代培養(yǎng)成功,并獲得可以繼續(xù)傳代的安穩(wěn)細胞系。培養(yǎng)的羊水細胞體外添加靈敏,倍增時間約36h。流式細胞儀查看閃現(xiàn)細胞表達CD29、CD44、CD105 等間充質(zhì)干細胞表面標志,不表達造血干細胞表面標志CD45 和CD133。RT - PCR 的成果標明分別獲得的干細胞表達Oct - 4 和Nanog 基因,且不相同代的細胞間均有表達。Oct - 4 和Nanog 被認為是干細胞多能分化的首要調(diào)理因子,干細胞分化后其表達當即下調(diào)。以上成果與文獻報道一起,標明羊水細胞經(jīng)體外培養(yǎng)擴增可以得到具有MSCs 性質(zhì)的干細胞。

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