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    如何讓ELISA試劑盒陽(yáng)性判定值更準(zhǔn)確

    發(fā)布時(shí)間: 2017-01-26  點(diǎn)擊次數(shù): 1851次

    ELISA試劑盒試驗(yàn)3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此計(jì)劃,則棄去,算了另兩個(gè)陰性對(duì)照從頭核算NCX;
    如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上計(jì)劃,則該次試驗(yàn)無(wú)效。
    在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。
    現(xiàn)舉某種檢查 HBsAg的試劑盒為例。
    先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽(yáng)性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N)的吸光值,然后進(jìn)行核算。
    核算方法有多種,大致可分為陽(yáng)性斷定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類(lèi)。
    陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。
    ELISA試劑盒陽(yáng)性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過(guò)對(duì)許多標(biāo)本的試驗(yàn)檢查而得到的。ELISA試劑盒陽(yáng)性斷定值(cut-off value)一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),以此作為區(qū)別作用陽(yáng)性或陰性的規(guī)范。
    用此法區(qū)別作用央求試驗(yàn)條件非常穩(wěn)定,試劑的制備有必要規(guī)范化,陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)范,須配用精密的儀器,并嚴(yán)重按規(guī)則操作。
    ELISA試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,目視法簡(jiǎn)捷明晰,但頗具主觀性。
    測(cè)得A值后,先核算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)(NC X )和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX),兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)有必要大于一個(gè)特定的數(shù)值(例0.400),試驗(yàn)才有用。
     

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